大肠杆菌海藻糖合成酶基因的克隆和表达

被引：17

作者：

戴秀玉

吴大鹏

周坚

机构：

[1] 中国科学院微生物研究所!北京,中国科学院微生物研究所!北京,中国科学院微生物研究所!北京

来源：

遗传学报 | 2000年 / 02期

基金：

“九五”攻关项目;

关键词：

otsBA基因; 海藻糖; 细胞内克隆; 表达;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q933 [微生物遗传学];

学科分类号：

071007 ;

摘要：

利用Ｍｕ转座子细胞内克隆了大肠杆菌海藻糖合成酶ｏｔｓＢＡ基因，克隆频率为１．４５ｘ１０(－３)／Ｋａｎ(ｒ)转导子。经遗传互补、酶切和部分序列分析表明ｏｔｓＢＡ基因位于克隆质粒。亚克隆２．８７ｋｂＤＮＡ片段至不同拷贝数表达质粒并分别转化大肠杆菌ｏｔｓＢＡ基因缺失株，转化株恢复在０．５ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ培养基上生长的功能，高渗透压诱导实验表明，转化株能够合成克隆基因产物海藻糖，但合成量不受克隆质粒拷贝数影响。海藻糖良好的抗高渗能力可能在农作物育种方面发挥重要作用。为构建含有海藻糖合成酶基因的植物表达载体，并在农杆菌的介导下转入植物，赋予其抗高渗、耐干旱能力奠定了重要的研究基础。

引用

页码：158 / 164

页数：7

共 4 条

[1] 薄层层析法测定海藻糖 [J].

周坚 ;

吴大鹏 ;

程萍 ;

戴秀玉 .

微生物学通报, 1997, (02) :125-127

[2] 海藻糖的生理功能、分子生物学研究及应用前景 [J].

戴秀玉，程苹，周坚，江慧修 .

微生物学通报, 1995, (02) :102-104

[3]

复合多糖生化研究技术[M]. 上海科学技术出版社 , 张惟杰主编, 1987

[4]

Mini--Mu bacteriphape with plasmid replicons for in vivo cloning and lacgene fusing. Groisman E A, Casadaban M J. Journal of Bacteriology . 1986

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