猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白基因的克隆与原核表达研究

被引：7

作者：

邱德新

陈焕春

万绍贵

机构：

[1] 华中农业大学畜牧兽医学院,华中农业大学畜牧兽医学院,华中农业大学畜牧兽医学院湖北武汉,,湖北武汉,,湖北武汉,

来源：

中国病毒学 | 2003年 / 02期

关键词：

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV); 核衣壳蛋白基因(orf7); 克隆与原核表达;

D O I：

暂无

中图分类号：

S858.28 [猪];

学科分类号：

0906 ;

摘要：

采用RT-PCR方法自猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组分离出核衣壳蛋白基因(orf 7),克隆到pMD18-T载体构建成重组质粒pMD18N并进行测序比较,结果表明,所克隆的核衣壳蛋白基因序列与PRRSV美洲型ATCC VR-2332株的同源性为100%,表明orf 7 是PRRSV基因组内很保守的序列;将orf 7亚克隆到原核表达载体pGEX-KG,构建成重组质粒pGEX-KGN,用pGEX-KGN转化表达菌株BL21,经SDS-PAGE和 Western-blot分析表明:克隆在谷胱苷肽转移酶(Glutathione S-transferase(GST)下游的核衣壳蛋白基因与GST获得了高效融合表达,表达的融合蛋白GST-N分子量约为41kDa,并且有免疫学反应活性;这为猪繁殖与呼吸综合征的血清学诊断方法的建立打下了基础。

引用

页码：48 / 53

页数：6

共 13 条

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