重金属铅多克隆抗体的制备及鉴定

被引：9

作者：

翟一凡 ^{[1
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向军俭 ^{[1
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唐勇 ^{[1
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郭常伟 ^{[1
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刘小锋 ^{[2
]}

杨红宇 ^{[1
]}

机构：

[1] 暨南大学抗体工程中心

[2] 广州市千江企业有限公司

来源：

食品科学 | 2010年 / 13期

关键词：

铅离子; 合成抗原; ELISA; 多克隆抗体;

D O I：

暂无

中图分类号：

R392.1 [免疫生物学];

学科分类号：

100108 [医学免疫学];

摘要：

目的:合成铅离子完全抗原,并对其进行鉴定;用合成的完全抗原免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体,鉴定效价和特异性。方法:用双功能螯合剂p-SCN-Bn-DTPA将Pb2+与载体蛋白BSA和OVA偶联在一起,合成免疫抗原(Pb-DTPA-BSA)和检测抗原(Pb-DTPA-OVA),并通过SDS-PAGE、紫外扫描、电感耦合等离子体(ICP)检测抗原中Pb2+含量,以及通过免疫Balb/c小鼠,采集血清进行间接ELISA和竞争ELISA检测。结果:两种合成的抗原相对于各自的载体蛋白均出现了蛋白条带滞后,紫外吸收峰偏移等现象;免疫的4号和5号Balb/c小鼠的抗血清效价达1:400000;与OVA无交叉反应,ELISA检测IC50值为1.5ng/mL,与Fe3+有近5%的交叉反应,与其他重金属离子的交叉反应均小于1%。结论:铅离子多克隆抗体制备成功。

引用

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