猪链球菌9型荧光定量PCR检测方法的建立及应用

被引:12
作者
拜廷阳 [1 ]
杨增岐 [1 ]
吴志明 [2 ]
普志平 [3 ]
赵明军 [2 ]
闫若潜 [2 ]
机构
[1] 西北农林科技大学动物医学院
[2] 河南省动物疫病预防控制中心
[3] 周口市动物疫病预防控制中心
关键词
猪链球菌9型; 荧光定量PCR; TaqMan荧光探针; 检测方法;
D O I
10.13207/j.cnki.jnwafu.2008.01.025
中图分类号
S854.43 [];
学科分类号
摘要
【目的】建立猪链球菌9型(SS9)的快速诊断和定量分析方法。【方法】根据GenBank已登录的SS9cps9H基因保守部分序列设计合成引物和TaqMan荧光探针,建立了SS9的TaqMan荧光定量PCR检测方法(Taq-Man FQ-PCR),并进行了敏感性、特异性和重复性试验;利用所建立的检测方法对河南省11例疑似猪链球菌临床样品进行了应用检测,并与常规PCR方法进行了对比。【结果】成功建立了SS9的FQ-PCR检测方法和定量标准曲线,FQ-PCR方法的检测灵敏度可达1.0拷贝/μL,特异性高且重复性良好;利用该方法对11份临床疑似猪链球菌感染组织病料进行的应用检测表明,其中有3份样品为阳性,与常规PCR方法检测的阳性符合率为100%。【结论】成功建立的SS9 FQ-PCR诊断方法,可用于临床SS9型病菌感染的快速诊断及样品中细菌含量的定量分析。
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