猪生殖与呼吸综合征病毒TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立

被引：45

作者：

宋志军 ^{[1
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宋长绪 ^{[2
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杨增岐 ^{[1
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朱道中 ^{[3
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武占银 ^{[4
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蒋智勇 ^{[2
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林志雄 ^{[3
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刘燕玲 ^{[2
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张福良 ^{[1
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机构：

[1] 西北农林科技大学动物科技学院

[2] 广东省农业科学院兽医研究所

[3] 广州出入境检验检疫局

[4] 宁夏动物防疫站

来源：

中国兽医科学 | 2006年 / 02期

基金：

广东省自然科学基金;

关键词：

猪生殖与呼吸综合征病毒; 实时定量RT-PCR; TaqMan荧光探针;

D O I：

10.16656/j.issn.1673-4696.2006.02.004

中图分类号：

S858.28 [猪];

学科分类号：

0906 ;

摘要：

根据GenBank登录的PRRSV保守基因序列设计合成了引物和探针,并对其进行了筛选;对荧光定量PCR的反应条件进行了优化,建立了TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法。同时用建立的检测方法对组织病料进行了检测,并与常规RT-PCR做了对比。结果显示,所建立的TaqMan荧光定量RT-PCR方法灵敏度可达5.0×100拷贝/μL,比常规RT-PCR灵敏度高100倍。用该方法对东莞、增城、湛江等地的猪血清和多种组织样品进行了检测。结果,该方法与常规RT-PCR检测方法的阳性符合率为100%。用该方法对3份不同的组织样品进行了重复检测,结果表明,该方法具有良好的重复性,可满足当前PRRS的诊断需要。

引用

页码：98 / 102

页数：5

共 11 条

[1] PRRSV间接免疫荧光检测法的建立和应用 [J].