正常小鼠巨噬细胞及外周血淋巴细胞亚群对防风多糖干预的反应

目的:有研究证明,防风多糖具有明显的体内抗肿瘤作用。实验拟进一步探讨防风多糖对正常小鼠巨噬细胞及外周血淋巴细胞亚群的影响。方法:实验于2006-8/11在河北北方学院实验中心完成。防风多糖提取方法:取已粉碎、真空干燥的一定量防风用85%乙醇回流提取1h,挥干溶剂,加入适量三蒸水回流提取4h,趁热滤过,滤渣加入三蒸水继续回流2h,合并2次滤液,减压浓缩,4倍体积无水乙醇醇沉,静置过夜,沉淀分别用无水乙醇、丙酮、石油醚依次洗涤即得防风粗多糖。采用苯酚-硫酸法测多糖含量。昆明种健康小白鼠120只,雌雄不拘,体质量20～25g,由本院动物中心提供,实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。实验方法:将120只昆明种小白鼠按随机数字表法分为4组:空白对照组和防风多糖250,500,1000mg/kg剂量组,每组30只,每天给药1次,连续7d。每组10只末次给药后1h,取腹腔液制片瑞士染色,观察小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬情况。另10只剥取脾脏称重,计算脾指数,碘化丙啶综合染液染色,采用FACSAria流式细胞仪进行检测,ModFit软件进行细胞周期分析脾细胞增殖指数。剩余10只采用FACSAria流式细胞仪检测外周血淋巴细胞亚群的比例。结果:120只小鼠均进入结果分析。①与对照组比较,中、高剂量组防风多糖均可提高小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬百分率和吞噬指数(P<0.05～0.01)。②各剂量组均可明显提高小鼠脾细胞的增殖指数,与对照组比较,差异有显著性意义(P<0.01);各剂量组小鼠的脾指数虽高于对照组(P<0.05),但组间无统计学意义(P>0.05)。③随着防风多糖浓度的增加,CD3+CD4+与CD3+CD8+比值增高(P<0.05～0.01)。与对照组比较,实验组CD19+的比例增高(P<0.05～0.01),但变化无剂量依赖性。结论:防风多糖具有剂量依赖性的提高小鼠特异性免疫和细胞免疫功能,并促进小鼠脾淋巴细胞的增殖;对小鼠体液免疫功能的影响无剂量依赖性。