影响PCR-SSCP的因素分析

ＰＣＲ－ＳＳＣＰ是一种基于 ＰＣＲ的单链构象多态性（ｓｉｎｇｌｅ－ｓｔｒａｎｄｅｄ ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ）分析技术，是ＤＮＡ已知突变的检测或未知变异分析中十分常用和实用的技术之一。本研究从非变性聚丙烯酰胺凝胶的配制、样品的变性处理、电泳条件、显色方法和结果分析等方面对影响 ＰＣＲ－ＳＳＣＰ实验室操作的因素进行了分析，并结合作者的经验给出了大小在 １００～２００ｂｐ范围以内的 ＤＮＡ片段进行ＳＳＣＰ分析的操作程序：凝胶浓度为 １０ ％～１５％， ９８℃变性５～１０ ｍｉｎ， ４℃条件下 ５ Ｗ过夜电泳，银染法染色。