脂质过氧化诱导培养的人脐静脉内皮细胞表达巨噬细胞炎性蛋白1α

为了解脂质过氧化损伤能否诱导内皮细胞表达巨噬细胞炎性蛋白 1α ,用不同浓度 (1、5和 10 μmol L)的联胺刺激培养人脐静脉内皮细胞脂质过氧化损伤 ,用硫代巴比妥酸荧光微量测定法测定样品中的丙二醛含量 ;用一步法提取RNA ,反转录多聚酶链反应检测巨噬细胞炎性蛋白 1αmRNA ;用免疫细胞化学法检测巨噬细胞炎性蛋白 1α蛋白的表达。结果发现 ,随联胺浓度增高 ,各组丙二醛含量依次增高 (P <0 .0 5 ) ,分别为对照组的 2 .0、5 .3和8.6倍 (F =138.6 4,P <0 .0 1)。正常内皮细胞表达较低水平的巨噬细胞炎性蛋白 1αmRNA ,加联胺后各组巨噬细胞炎性蛋白 1αmRNA表达明显增加 ,分别是对照组的 4、6和 3.5倍。免疫细胞化学显示 ,巨噬细胞炎性蛋白 1α蛋白为棕黄色颗粒 ,主要分布于胞浆的核周区。图像分析结果显示各组细胞平均吸光度值增加 (P <0 .0 5 ) ,分别是对照组的 1.4、1.9和 1.3倍 (F =6 8.6 0 ,P <0 .0 1)。以上结果提示 ,联胺能引起内皮细胞脂质过氧化损伤 ,并诱导其产生巨噬细胞炎性蛋白 1α,吸引单核细胞粘附于内皮 ,并向内皮下间隙迁移 ,在动脉粥样硬化发生过程中可能起重要作用。