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一种简便的同步提取烟草叶片DNA和总RNA的方法附视频
被引:5
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章镇
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机构:
南京农业大学园艺学院 南京农业大学园艺学院
机构:
[1] 南京农业大学园艺学院
[2] 江苏省中国科学院植物研究所
来源:
关键词:
烟草叶片;
DNA;
总RNA;
提取方法;
同步;
D O I:
暂无
中图分类号:
S572 [烟草(菸草)];
学科分类号:
摘要:
以野生型和转几丁质酶烟草株系叶片为材料,采用改进的CTAB法对其DNA和总RNA进行同步提取和DNA中RNA的消化以及总RNA中DNA的消化,并分别进行了电泳检测、含量测定和相应的PCR和RT-PCR检测。结果表明:用该法提取的DNA条带清晰、无降解,所提取的DNA浓度在109.20~245.46μg/mL,OD260/OD280在1.83~1.94。以提取的DNA为模板,PCR能够扩增出清晰的目的条带。RNA具有5.8SrRNA、18S rRNA和28S rRNA 3条清晰的条带,且无降解。RNA浓度在355.57~570.13μg/mL,OD260/OD280在1.84~2.04,OD260/OD230在2.06~2.33。RNA逆转录成cDNA,经PCR扩增出清晰的看家基因和目的基因条带。
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