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人胰岛素样生长因子1的真核细胞表达及其鉴定
被引：1
作者：
徐志伟
娄亚欣
李莹
邓鸿业
邓玉兰
机构：
[1] 北京大学医学部免疫学系!北京
来源：
关键词：
人胰岛素样生长因子1;
基因重组;
真核细胞表达;
活性鉴定;
D O I：
10.13431/j.cnki.immunol.j.20010001
中图分类号：
R341 [];
学科分类号：
1001 ;
摘要：
目的构建人胰岛素样生长因子 1(IGF- 1)的真核细胞表达质粒。方法用 PCR方法从人的肝细胞 c DNA文库中克隆出 IGF- 1c DNA,然后定向插入真核细胞表达载体 pc DNA3中 ,并用脂质体方法转染 COS7细胞。用 EL ISA法和人胚肺纤维母细胞以及 NIH3T3纤维细胞增殖法分别测定转染细胞上清液中 IGF- 1的含量和生物活性。结果重组的真核细胞表达质粒 pc DNA 3- IGF- 1所含的 IGF- 1c DNA序列和插入方向均正确 ,其转染的 COS7细胞分泌较高浓度的 IGF- 1,并且具有明显促进纤维细胞增殖的能力。结论本实验所构建的重组真核细胞表达质粒 pc DNA3- IGF- 1能够高效表达有活性的 IGF- 1,对进一步研究 IGF- 1体内表达的生理和病理作用有一定意义
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