草鱼胰岛素样生长因子-Ⅰ基因在大肠杆菌中的表达

被引:11
作者
叶星
白俊杰
简清
李新辉
李英华
李凯彬
罗建仁
机构
[1] 中国水产科学研究院珠江水产研究所,农业部热带亚热带鱼类选育与养殖重点开放实验室,中国水产科学研究院珠江水产研究所,农业部热带亚热带鱼类选育与养殖重点开放实验室,中国水产科学研究院珠江水产研究所,农业部热带亚热带鱼类选育与养殖重点开放实验室,中国水产科学研究院珠
关键词
草鱼; 胰岛素样生长因子-Ⅰ; 大肠杆菌表达; 生物活性;
D O I
10.13865/j.cnki.cjbmb.2001.06.013
中图分类号
Q786 [基因的表达];
学科分类号
071007 ; 0836 ; 090102 ;
摘要
为构建草鱼 (Ctenopharyngodonidellus )胰岛素样生长因子 Ⅰ (IGF Ⅰ )大肠杆菌表达质粒 ,对已克隆到的草鱼IGF Ⅰ基因进行改造 .改造后的基因去除了原cDNA的信号肽和E区序列 ,并在基因的两端分别加入起始密码子和终止密码子 .将改造后的编码草鱼IGF Ⅰ成熟肽基因亚克隆到pBV 2 2 0中 ,构建成表达质粒pBVgIGF7.转化大肠杆菌 (Escherichiacoli)进行表达 .SDS PAGE显示 ,含重组表达质粒的菌株经热诱导后表达出一约 7 5kD的特异蛋白 .表达量占菌体总蛋白的2 0 0 3% ,表达产物主要以包涵体形式存在 .重组蛋白经纯化和复性后 ,采用MTT法测定其对草鱼吻端成纤维细胞PSF和草鱼卵巢细胞CO的促增殖作用 .结果表明 ,所获得的重组草鱼IGF Ⅰ具有生物活性
引用
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