工程菌人溶菌酶的纯化和性质

将人溶菌酶工程菌株在发酵培养、菌体经超声破碎、变性和复性后所得的粗酶液经Ｅｘｐｒｅｓ ＩｏｎＳ阳离子交换柱层析，得到电泳纯的酶，比活达到４８０００ｕ／ｍｇ。此酶的最适ｐＨ为６５；等电点为８９１；对溶壁微球菌的米氏常数Ｋｍ＝００３１１ｍｇ／ｍＬ；６０℃保温３０ｍｉｎ，酶活力剩余４８３％。Ｎ末端氨基酸序列除了第一个Ｍｅｔ，其余４个与预期相符。一些重金属离子对酶的活性影响不尽相同，在００１ｍｏｌ／Ｌ的浓度下Ｃｕ２＋可使该酶完全失活。