花椒挥发油抗肿瘤药理作用研究

目的提取花椒挥发油,并对其进行抗人肺癌杀伤及诱导凋亡试验。观察花椒是否具有抗肿瘤活性,并确定其最小杀伤肿瘤细胞的剂量;同时观察诱导细胞凋亡的最小剂量以确定其抗肿瘤机制。方法利用改进水蒸气法提取花椒挥发油,利用Tween-80作为助溶剂对花椒倍比稀释,对人A549肺癌细胞进行抗肿瘤试验,利用SRB方法和形态学确认细胞杀伤率,采用荧光染料Hochest33258染色检测细胞的凋亡水平。将试验同时分为时间-效应组(24、48、72h)和剂量-效应组(0.125～16mg/ml)。结果≥4mg/ml以上剂量的花椒挥发油提取物对A549具有较高的抑瘤率,达到87·9%;最低抑瘤浓度为1mg/ml,抑瘤率为40·2%。形态学观察结果表明,被杀伤的细胞体积萎缩,细胞膜皱缩,成活细胞数稀疏,数量明显低于空白对照组。不同给药时间的研究结果表明,药物最佳作用时间为48h及72h。利用低于杀伤浓度的剂量作用于A549进行研究,观察其对A549细胞凋亡的影响,利用Hochest33258观察对细胞核的影响。结果表明,0·5～1mg/ml剂量的花椒挥发油提取物作用于细胞72h对肿瘤细胞具有明显的诱导细胞凋亡作用。结论高浓度(4～16mg/ml)的花椒挥发油对人肺癌A549细胞株有杀伤作用,低浓度(1mg/ml)的花椒挥发油对A549有诱导细胞凋亡的作用。