小麦内源特异参照基因的查找与定性PCR和实时荧光PCR验证

被引：6

作者：

栾凤侠

张洪祥

白月

机构：

[1] 黑龙江出入境检验检疫局

来源：

生物技术 | 2006年 / 06期

关键词：

小麦; 内源参照基因; 小麦γ-醇溶蛋白; GAG56D; PCR; Real-time PCR;

D O I：

10.16519/j.cnki.1004-311x.2006.06.019

中图分类号：

S512.1 [小麦];

学科分类号：

0901 ;

摘要：

目的:先从理论上查找和比对了小麦属(Triticum)γ-醇溶蛋白基因(GAG56D)为小麦特异的内源基因,并用定性PCR和实时荧光PCR方法从实验特异性上进行了验证。方法:选择小麦基因组中部分基因序列在NCBI中进行同源性分析,查找在小麦中存在的内源特异参照基因,找到小麦属(Triticum)特异的γ-醇溶蛋白基因(GAG56D),设计并合成该基因的引物和探针序列,同时用定性PCR和实时荧光PCR方法进行检测,并优化了实验条件。结果:不仅在理论上查找和比对了γ-醇溶蛋白基因为小麦特异的内源基因,并用定性PCR和实时荧光PCR方法进行了实验特异性的验证。定性PCR产物经过琼脂糖凝胶电泳分析后,只在小麦属中可以检测到328bp的目的片段,而在其它作物中未扩增出目的片断。同样实时荧光PCR验证的结果小麦属内各个种均有扩增曲线出现,而在其它作物没有扩增曲线出现中。结论:该基因与方法可用作检测小麦属(唯一小麦种是栽培作物)内源特异参照基因。

引用

页码：50 / 52

页数：3

共 8 条

[1] 优质HMW谷蛋白亚基转基因小麦的获得及其遗传稳定性和品质性状分析 [J].

张晓东 ;

梁荣奇 ;

陈绪清 ;

杨凤萍 ;

张立全 ;

不详 .

科学通报 , 2003, (05) :474-479

[2] 小麦醇溶蛋白和谷蛋白研究进展 [J].

董超华 ;

徐如宏 ;

张庆勤 .

山地农业生物学报, 2003, (02) :164-168

[3]

Genetic relationships amonghard red winter wheat cultivars as evaluated by pedi-gree analysis and gliadinpolyacrylamide gel electrophoretic patterns. Cox T S,G L Lookhart,D E Walker,et al. Crop Science . 1985

[4]

ASP[P]. 韩国专利:KR20120130370A,2012-12-03

[5]

Wheat storage proteins:theirgenetics and their potential for manipulation by plant breeding. Payne P I,L M Holt,E A Jackson,et al. Philos TransR Soc London Ser B . 1984

[6]

Gliadin allele identification in common wheatⅡ.Cata-logue of gliadin alleles in common wheat. Metakovsky E V. J Genet&Breed . 1991

[7] 小麦醇溶蛋白的遗传与品质改良 [J].

晏月明 ;

刘广田 ;

Ｓ．Ｐｒｏｄａｎｏｖｉｃ ;

Ｄ．Ｚｏｒｉｃ .

麦类作物学报 , 1998, (01) :4-7

[8] 小麦染色体组的起源与进化 [J].

何瑞锋 .

生物学通报, 1999, (05) :3-5

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