转根癌农杆菌介导的AtNHX1基因马铃薯的获得

被引：9

作者：

张俊莲 ^{[1
]}

王丽 ^{[2
]}

王蒂 ^{[1
]}

张金文 ^{[3
]}

陈正华 ^{[4
]}

机构：

[1] 甘肃农业大学甘肃省作物遗传改良与种质创新重点实验室

[2] 甘肃农业大学生命科学技术学院

[3] 甘肃农业大学农学院

[4] 甘肃亚盛集团博士后科研工作站北京分站

来源：

作物学报 | 2007年 / 07期

关键词：

马铃薯; 根癌农杆菌; 转基因植株; AtNHX1基因;

D O I：

暂无

中图分类号：

S532 [马铃薯（土豆）];

学科分类号：

090104 [作物信息科学与技术];

摘要：

构建重组表达质粒pBI12135-GZ+AtNHX1(带有CaMV35S启动子),通过农杆菌将其携带的液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因(AtNHX)转化马铃薯栽培品种“甘农薯2号”试管薯薄片和“克新2号”茎段。经根癌农杆菌侵染和共培养后,用50mgL-1卡那霉素+300mgL-1头孢霉素筛选抗性芽,试管薯薄片获得30株抗性植株,抗性植株再生率为37%;茎段未获得抗性植株。抗性植株的总DNA用AtNHX1基因的特异性引物进行PCR检测,结果27株为阳性,占90%。Southern杂交结果证实,外源基因多以双拷贝整合到马铃薯的基因组中。Northern杂交结果表明,转基因植株可以进行AtNHX1基因mRNA的正常转录,但植株间存在着转录量的差异。该研究为耐盐马铃薯的培育奠定了良好的基础。

引用

页码：1067 / 1072

页数：6

共 5 条

[1]

pBⅠ121载体酶切位点添加及拟南芥Na+/H+逆向转运蛋白基因表达载体的构建 [J].