比较牙龈卟啉单胞菌脂多糖诱导THP-1和HL-60细胞分泌IL-1β能力及相关信号通路受体的差异

被引:4
作者
李盛来 [1 ]
张迪亚 [2 ]
严杰 [3 ]
陈莉丽 [2 ]
机构
[1] 浙江大学医学院附属口腔医院
[2] 浙江大学医学院附属第二医院口腔科
[3] 浙江大学医学院病原生物学系
关键词
牙龈卟啉单胞菌; 脂多糖; 细胞; IL-1β; Toll样受体;
D O I
暂无
中图分类号
R781.4 [牙周病];
学科分类号
100201 [内科学];
摘要
目的探讨牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Porphyromonas gingivalis,Pg-LPS)诱导人单核巨噬细胞株THP-1和人粒细胞白血病细胞株HL-60分泌白介素-1β(interleukin,IL-1β)能力差异,并了解其相关Toll样受体。方法采用酚水法提取牙龈卟啉单胞菌ATCC33277株脂多糖(Pg-LPS)。采用ELISA试剂盒定量检测Pg-LPS作用的THP-1和HL-60细胞分泌IL-1β水平。采用TLR2或TLR4抗体阻断试验联合ELISA检测,了解Pg-LPS结合不同靶细胞上Toll样受体的类型。实验中采用大肠杆菌脂多糖(E-LPS)作为Pg-LPS对照。结果1μg/mlPg-LPS作用6h或1μg/mlE-LPS作用24h,THP-1细胞分泌的IL-1β水平明显升高(P<0.01),但Pg-LPS和E-LPS诱生的细胞因子最高浓度相近(P>0.05)。而1μg/mlPg-LPS作用24h或1μg/mlE-LPS分别作用48h,HL-60细胞分泌的IL-1β水平明显升高(P<0.01),且Pg-LPS诱生的最高浓度明显高于E-LPS(P<0.05),但HL-60细胞分泌的上述胞因子最高浓度均明显低于THP-1细胞(P<0.01);TLR2和TLR4抗体均可有效阻断Pg-LPS诱导THP-1细胞分泌IL-1β的活性(P<0.05),但仅发现TLR2抗体可阻断Pg-LPS诱导HL-60细胞分泌IL-1β的活性(P<0.05)。E-LPS诱导THP-1细胞或HL-60细胞分泌IL-1β的活性仅可被TLR4抗体所阻断(P<0.05)。结论Pg-LPS诱导THP-1和HL-60细胞分泌IL-1β高于E-LPS。TLR2和/或TLR4作为Pg-LPS受体取决于细胞种类。
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