免疫斑点法和免疫捕获RT-PCR检测黄瓜绿斑驳花叶病毒

被引：34

作者：

尚海丽

周雪平

吴建祥

机构：

[1] 浙江大学农业与生物技术学院生物技术研究所

来源：

浙江大学学报(农业与生命科学版) | 2010年 / 36卷 / 05期

基金：

浙江省自然科学基金;

关键词：

黄瓜绿斑驳花叶病毒; 多克隆抗体; dot-ELISA; IC-RT-PCR;

D O I：

暂无

中图分类号：

S436.421 [黄瓜病虫害];

学科分类号：

090401 [植物病理学];

摘要：

黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)是葫芦科作物上重要的病毒之一.用提纯的黄瓜绿斑驳花叶病毒免疫新西兰大白兔制备CGMMV的多克隆抗体.该多克隆抗体的间接ELISA效价达1∶512 000,与CGMMV17.5 ku外壳蛋白有特异性反应,而与烟草花叶病毒、齿兰环斑病毒和健康植物没有任何反应.用ACP-ELISA分析多抗灵敏度表明多抗检测1∶40 960倍稀释的CGMMV病叶时仍呈阳性反应.用该多抗建立了检测CGMMV的免疫斑点法(dot-ELISA)和免疫捕获RT-PCR方法(IC-RT-PCR).病叶汁液可被dot-ELISA检出的最大稀释度为1∶10 240.IC-RT-PCR从感染CGMMV的病叶组织中扩增到与预期大小相同的480 bp DNA条带,且当CGMMV病叶稀释1∶163 840倍时检测仍呈阳性.检测CGMMV的dot-ELISA和IC-RT-PCR方法的建立为该病毒病的诊断和控制提供了技术支撑.

引用

页码：485 / 490

页数：6

共 7 条

[1]

南瓜种子中黄瓜绿斑驳花叶病毒IC-RT-PCR检测方法的建立 [J].