古菌Pyrococcus furiosus嗜热α-淀粉酶基因在酿酒酵母中的表达

被引：5

作者：

沈微

华国强

王正祥

唐雪明

诸葛健

机构：

[1] 江南大学生物工程学院和教育部工业生物技术重点实验室

[2] 江南大学生物工程学院和教育部工业生物技术重点实验室无锡

[3] 无锡

来源：

微生物学通报 | 2003年 / 03期

关键词：

Pyrococcus furiosus; 胞外α-淀粉酶; 酿酒酵母;

D O I：

10.13344/j.microbiol.china.2003.03.006

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

用PCR方法从嗜热古菌Pyrococcusfuriosus的基因组DNA中扩增出胞外α 淀粉酶成熟肽结构基因 ,插入 pUC19中构建成质粒 pUC19 amy。将 pUC19 amy外源片段接入酿酒酵母表达载体 pYX2 12多克隆位点 ,构建成载体 pYX2 12 amy ,电转化酿酒酵母W 30 3 1A。转化子成功表达出有活性的高嗜热α 淀粉酶。重组酶具有与P furiosus产生的胞外α 淀粉酶相似的酶学性质 :最适 pH为 5 0 ,最适温度约为 90℃ ,在 12 1℃下热处理 30min酶活仍能保持 5 0 %以上

引用

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