猪γ干扰素基因的克隆、表达及其纯化

被引：25

作者：

郭瀛军

吴丹

陈蕊雯

孙树汉

机构：

[1] 第二军医大学医学遗传学教研室!上海,第二军医大学医学遗传学教研室!上海,第二军医大学医学遗传学教研室!上海,第二军医大学医学遗传学教研室!上海

来源：

生物工程学报 | 2001年 / 02期

关键词：

γ干扰素; 基因表达; 分离纯化; 大肠杆菌;

D O I：

10.13345/j.cjb.2001.02.017

中图分类号：

Q785 [转化及克隆];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

以RT PCR方法 ,从经丝裂原诱导的猪外周血淋巴细胞总RNA中扩增出编码猪IFNγ的基因。经测序证实后插入载体pJLA 5 0 3 ,并实现在大肠杆菌中的高表达。表达产物以包涵体形式存在 ,经 7mol/L盐酸胍变性及精氨酸存在的情况下复性。再经DEAE Sepharose离子交换柱、Sephdex 2 0 0凝胶过滤柱分离获得电泳单一纯猪IFN γ蛋白 ,细胞病变抑制实验检测纯化产物有干扰素活性。

引用

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