平榛主要过敏原Cor h 1的克隆表达、纯化及免疫学鉴定

被引：7

作者：

莫绪成

吴序栎

刘志刚

机构：

[1] 深圳大学过敏反应与免疫学研究所

来源：

免疫学杂志 | 2009年 / 02期

关键词：

平榛; Cor h1; 基因克隆; 表达;

D O I：

10.13431/j.cnki.immunol.j.20090050

中图分类号：

R392.11 [免疫分子生物学（免疫化学）];

学科分类号：

100102 ;

摘要：

目的克隆、表达榛(平榛)主要变应原基因Cor h1,检测其免疫学活性。方法提取平榛的总RNA,设计带有酶切位点的特异性引物,采用RT-PCR方法扩增目的基因,将其克隆入T载体中进行测序和分析。采用RT-PCR获得整个短的开放阅读框并将目的基因克隆到大肠杆菌表达载体pET28a中进行表达。通过Ni2+亲和层析,对重组蛋白进行纯化,采用免疫印迹(Western-blot)方法检测其IgE结合活性。结果克隆获得了平榛的主要过敏原Cor h1的基因,该基因被GenBank收录,登陆号为EU195058。基因开放阅读框为486个碱基(包括终止密码子),编码161个氨基酸。该序列编码的蛋白等电点为6.16,相对分子质量约为17600。结论成功地克隆和表达了平榛主要变应原Cor h1,蛋白具有良好的免疫原性。

引用

页码：187 / 190

页数：4

共 9 条

[1] 荔枝果实中profilin的表达纯化及其与桦树花粉Bet v 2的交叉反应性研究 [J].

张红云 ;

宋娟娟 ;

刘志刚 ;

康敏雄 .

免疫学杂志, 2007, (05) :541-544

[2] 平欧杂交榛子育苗及丰产栽培技术 [J].

孙万河 ;

聂洪超 ;

刘坤 ;

张玉君 ;

段学良 .

北方果树, 2007, (01) :17-18

[3] 粉尘螨Ⅱ类变应原的克隆表达、纯化及其免疫学特性 [J].

朱健琦 ;

刘志刚 ;

高波 ;

吉坤美 ;

邢苗 .

免疫学杂志 , 2006, (02) :213-216

[4] 我国北方榛树资源的现状及其开发利用前景 [J].

解明 .

北方果树, 1998, (03) :2-3

[5]

Inner City Asthma Study: Relationships among sensitivity, allergen exposure, and asthma morbidity[J] . Rebecca S. Gruchalla,Jacqueline Pongracic,Marshall Plaut,Richard Evans,Cynthia M. Visness,Michelle Walter,Ellen F. Crain,Meyer Kattan,Wayne J. Morgan,Suzanne Steinbach,James Stout,George Malindzak,Ernestine Smartt,Herman Mitchell.The Journal of Allergy and Clinical Immunology . 2005 (3)

[6]

Roasted hazelnuts – allergenic activity evaluated by double‐blind, placebo‐controlled food challenge[J] . K. SkamstrupHansen,B. K.Ballmer‐Weber,D.Lüttkopf,P. S.Skov,B.Wüthrich,C.Bindslev‐Jensen,S.Vieths,L. K.Poulsen.Allergy . 2003 (2)

[7]

Comparison of four variants of a major allergen in hazelnut ( Corylus avellana ) Cor a 1.04 with the major hazel pollen allergen Cor a 1.01[J] . Molecular Immunology . 2002 (7)

[8]

Identification of allergens in fruits and vegetables: IgE cross-reactivities with the important birch pollen allergens Bet v 1 and Bet v 2 (birch profilin)[J] . Christof Ebner,Reinhold Hirschwehr,Leonhardt Bauer,Heimo Breiteneder,Rudolf Valenta,Herwig Ebner,Dietrich Kraft,Otto Scheiner.The Journal of Allergy and Clinical Immunology . 1995 (5)

[9]

Strategies for converting allergens into hypoallergenic vaccine candidates .2 Vrtala,S,Focke-Tejkl,M,Swoboda,I,Kraft,D,Valenta,R. Methods . 2004

← 1 →