大鼠骨髓间充质干细胞和许旺细胞联合移植治疗脊髓损伤

目的:骨髓间充质干细胞和许旺细胞作为脊髓组织工程学的两个重要的种子细胞,均可进行自体移植,具有其他种子细胞无以比拟的优势。应用联合细胞移植治疗大鼠脊髓半横切模型,观察其疗效。方法:实验于2007-03/12在辽宁医学院科学实验中心完成。①实验材料:清洁级健康成年SD雄性大鼠60只,体质量250～300g,由辽宁医学院实验动物中心提供。将大鼠按随机数字表法分为3组:联合细胞组、骨髓间充质干细胞组、磷酸盐缓冲液组,每组20只。实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。②实验方法:采用全骨髓培养法制备大鼠骨髓间充质干细胞,混合酶消化法制备大鼠许旺细胞。制作大鼠右侧T10脊髓半横切模型,联合细胞组注射骨髓间充质干细胞和许旺细胞,骨髓间充质干细胞组注射骨髓间充质干细胞,磷酸盐缓冲液组注射磷酸盐缓冲液。③实验评估:术后4周行网格及斜板实验,并检测大鼠损伤区脊髓诱发电位波幅及潜伏期,并行苏木精-伊红染色、免疫组织化学染色观察。结果:纳入大鼠60只,每组术后各2只因腹胀及感染死亡,进入结果分析54只。①网格实验及斜板实验均显示,联合细胞组大鼠恢复情况明显优于其他两组(P<0.01),骨髓间充质干细胞组优于磷酸盐缓冲液组(P<0.01)。②神经电生理检测显示,联合细胞组诱发电位波幅比其他两组高(P<0.01),诱发电位潜伏期比其他两组短(P<0.01),骨髓间充质干细胞组优于磷酸盐缓冲液组(P<0.01)。③联合细胞组囊性病变区面积最小,其次是骨髓间充质干细胞组,磷酸盐缓冲液组囊性变区面积最大(P<0.01)。④联合细胞组损伤侧灰质内神经元样细胞数多于其他两组(P<0.01)。结论:骨髓间充质干细胞和许旺细胞可以联合移植,在体内存活良好,并互相协同促进损伤脊髓恢复,比单一细胞移植疗效更佳。