基于RAPD的青天葵遗传多样性及鉴别研究

目的建立及优化青天葵样品总DNA的提取方法及RAPD反应,探讨不同品种的青天葵及其替代品、伪品在DNA分子水平上的遗传多样性及其遗传关系。方法使用高盐低pH值法提取总DNA,采用随机扩增多态性DNA,从49条随机引物中筛选能扩出清晰条带的引物,对22个青天葵样品及伪品进行RAPD分析。用统计分析软件对扩增出的条带进行聚类分析,以Shonnon’s指数和Nei’s指数对青天葵遗传多样性进行估算。结果高盐低pH值法提取的新鲜样品纯度高,药材纯度低,但都能用于RAPD。选取能扩增出清晰条带的19条引物,把鲜品与干品分别聚类分析。干药材中小叶与中叶距离较近,与大叶及毛叶距离远。新鲜叶片中三种青天葵为一类,青天葵与其组培品、毛叶与红薯叶距离稍远,与车前草、积雪草距离最远。青天葵种群遗传多样性Shonnon’s指数为0.463,Nei’s指数为0.267,种群内遗传多样性较高,基因流为0.94。结论不同品种青天葵间及伪品在分子水平上存在差异,可用此方法鉴别青天葵。青天葵的遗传多样性大多是由地理环境造成的。