非洲猪瘟病毒环介导等温扩增诊断方法的建立

被引:15
作者
王华
王君玮
徐天刚
张维
任炜杰
王志亮
机构
[1] 中国动物卫生与流行病学中心国家外来动物疫病诊断中心ABSL-实验室
关键词
非洲猪瘟病毒; 环介导等温扩增反应; 诊断;
D O I
10.16656/j.issn.1673-4696.2010.09.011
中图分类号
S858.28 [猪];
学科分类号
摘要
通过对GenBank中登录的非洲猪瘟病毒(ASFV)p72蛋白基因序列进行分析,根据p72保守区序列设计合成了内(FIP,BIP)、外(F3,B3)2对引物,其中外引物扩增片段的大小为184bp。通过对反应条件进行优化,建立了非洲猪瘟LAMP检测方法。结果显示,该方法在62℃保温60min即可完成,最低可检测到1×101 copies/μL的病毒DNA,与常规PCR方法相比灵敏度高100倍。对ASFV、猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒基因组DNA同时检测,结果仅有ASFV出现条带,而其他均未出现目的条带。表明,建立的ASFV-LAMP诊断方法具有较好的特异性和敏感性。
引用
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