表达绿色荧光蛋白猪源植物乳杆菌重组菌株的构建

为了深入研究益生菌猪源植物乳杆菌的作用机理,构建含有标记基团绿色荧光蛋白的植物乳杆菌重组菌株,以达到良好区分动物内外源菌的目的。以具有红霉素耐药性(Em)和氨苄青霉素耐药性(AmpR)双筛选压力的大肠杆菌——乳酸杆菌穿梭表达载体pLEM415为基本骨架,将绿色荧光蛋白(GFP)及其表达原件乳酸脱氢酶启动子(PldhL)和嗜酸乳杆菌表面蛋白终止子(TslpA)插入该载体,构建GFP标记的穿梭表达载体pLEM415-GFP。利用电转化的方法将穿梭表达载体pLEM415-GFP转化入植物乳杆菌,获得重组植物乳相菌。结果表明:重组菌在蓝光激发下可见明显绿色荧光,连续传递10代仍可见明显荧光。结果显示,已成功构建表达GFP基因的重组植物乳杆菌,为益生菌在动物体内分布和定植规律的研究奠定了基础。