一种新型家蚕核多角体病毒Bac to Bac系统的构建

被引：6

作者：

邓小昭

朱应

刁振宇

齐义鹏

周宗安

机构：

[1] 南京军区军事医学研究所分子生物学实验室!南京

[2] 武汉大学病毒研究所!武汉

来源：

微生物学报 | 2000年 / 02期

关键词：

BmNPV; AcNPV昆虫病毒穿梭载体(Ac-Bacmid); 转座子Tn7; 乙肝病毒e抗原; 基因表达;

D O I：

10.13343/j.cnki.wsxb.2000.02.008

中图分类号：

S884.5 [病毒病（脓病）];

学科分类号：

0906 ;

摘要：

用家蚕核型多角体病毒的全基因组DNA与AcBacmidDNA共转染家蚕BmN细胞,构建转座一穿梭载体BmBacmid。另一供体质粒以转座方式将乙肝病毒e抗原基因HBeAg整合到BmBacmid的attTn7位点上成为重组rBmHBe。结果表明BmBacmid既能在大肠杆菌中以质粒的形式复制,又能在家蚕BmN细胞和草地夜蛾Sf9细胞中复制,形成感染性病毒粒子。Southernblotting证实重组病毒的构建是正确的。BmN细胞能正确识别与切割HBeAg信号肽序列,SDSPAGE表明HBeAg基因在家蚕细胞中高效表达,ELISA测定培养上清中HBeAg效价达1∶32000,细胞内HBeAg效价为1∶2000,培养液及细胞内的HBcAg含量极低(〈1∶160)。

引用

收藏

页码：43 / 48

页数：6

相关论文

共 4 条

[1] 用杆状病毒载体在家蚕细胞中表达HBeAg基因 [J].

邓小昭 ;

刁振宇 ;

何亮 ;

乔仁良 ;

张林元 .

中国病毒学, 1998, (01) :71-77

[2] HaNPV穿梭载体的构建及绿色荧光蛋白基因在棉铃虫中的表达 [J].

朱应 ;

齐义鹏 ;

刘德立 .

武汉大学学报(自然科学版), 1997, (06) :124-125

[3] 多角体蛋白的结构多样性和杆状病毒的进化研究 [J].

刘子夜 ;

齐义鹏 ;

王家旺 ;

黄永秀 .

生物多样性, 1997, (01) :14-25

[4]

基因工程原理和方法.[M].齐义鹏等编著;.四川大学出版社.1988,