纳豆枯草杆菌的筛选和纳豆激酶发酵条件优化

被引:42
作者
梅乐和
胡升
许静
姚善泾
郑晓冬
机构
[1] 浙江大学化学工程与生物工程系
[2] 杭州中美华东制药有限公司
关键词
纳豆激酶; 纳豆枯草杆菌; PlackettBurman设计; 响应面法;
D O I
暂无
中图分类号
TQ920.4 [原料];
学科分类号
摘要
纳豆激酶是由纳豆枯草杆菌产生的一种具有纤溶活性的丝氨酸蛋白酶。针对目前常用菌株的产酶活力较低、不能完全满足要求的问题,采用酪蛋白平板初筛—摇瓶复筛的筛选策略,从纳豆中筛选获得了一株高产纳豆激酶的菌株,该菌株在筛选培养基上进行摇瓶培养,发酵液中纳豆激酶的酶活达到970IU/mL.用Plackett Burman方法对影响液体发酵的各因素的效应进行了评价,并筛选出了有显著效应的四个主要因素:胰蛋白胨浓度、种龄、发酵温度和Na2HPO4浓度;在此基础上,用最陡爬坡路径逼近最大产酶条件区域;最后通过中心组合实验及响应面分析优化了纳豆枯草杆菌液体发酵的条件.通过在初始发酵条件和优化发酵条件下的对比研究,液体发酵液中纳豆激酶浓度从1005IU/mL提高到1314IU/mL,表明响应面法优化可成功地用于纳豆枯草杆菌液体发酵的条件优化.
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