超声波提取牛奶中细菌DNA方法的优化

被引：6

作者：

阎晓菲 ^{[1
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林善 ^{[1
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童婷 ^{[1
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王金泉 ^{[2
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黄可欣 ^{[1
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董轩 ^{[1
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岳美婷 ^{[1
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叶东东 ^{[3
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杨斌 ^{[1
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机构：

[1] 新疆农业大学科学技术学院

[2] 新疆农业大学动物医学学院

[3] 新疆维吾尔自治区奶业办公室

来源：

中国畜牧兽医 | 2014年 / 41卷 / 05期

关键词：

乳房炎; 细菌; 超声波; DNA提取; PCR;

D O I：

暂无

中图分类号：

S852.61 [病原细菌];

学科分类号：

090507 [智慧养殖与动物生产学];

摘要：

本试验通过采集乌鲁木齐燕儿窝种牛场2003年5月份所有泌乳奶牛的牛奶样品,使用不同超声波功率(0、100、120、140、160W)处理后,采用十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)、十二烷基磺酸钠(SDS)法提取牛奶中细菌DNA,并通过DNA浓度、纯度和细菌通用引物扩增16SrDNA的V6-V8区判定DNA的质量,筛选出提取牛奶中细菌DNA的最佳方法。结果表明,未使用超声波处理样品,直接采用CTAB、SDS法提取出的DNA无法扩增出细菌16SrDNA V6-V8区,而使用不同超声波功率(100、120、140、160W)处理后能扩增出细菌16SrDNA V6-V8区,其中超声波功率140W处理样品10min并结合CTAB法提取牛奶中细菌DNA的浓度最高,为203.35μg/mL。因此,超声波功率140W处理样品并结合CTAB法提取牛奶中细菌DNA的方法最优,能满足从分子水平上进一步研究乳房炎相关细菌的要求。

引用

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页数：5

共 12 条

[1]

大连地区奶牛隐性乳房炎主要病原菌的分离鉴定及药敏试验 [J].