免疫亲和层析法纯化苦瓜几丁酶

被引:2
作者
裴炎
杨星勇
卢晓风
夏玉先
李先碧
机构
[1] 西南农业大学生物技术研究中心!重庆,西南农业大学生物技术研究中心!重庆,西南农业大学生物技术研究中心!重庆,西南农业大学生物技术研究中心!重庆,西南农业大学生物技术研究中心!重庆
关键词
苦瓜; 免疫亲和层析; 几丁酶;
D O I
10.13865/j.cnki.cjbmb.1999.06.024
中图分类号
Q55 [酶];
学科分类号
071010 ; 081704 ;
摘要
用扁豆几丁酶免疫家兔,获得抗扁豆几丁酶的抗体,将此抗体与Sepharose 4B偶联,制备免疫亲和吸附剂,用以纯化苦瓜几丁酶.苦瓜叶片的粗提液经过免疫亲和吸附柱后,可获得电泳纯的几丁酶,其分子量为35 kD,与用几丁质凝胶为亲和吸附剂的纯化结果一致.表明利用植物几丁酶在结构上的保守性,用免疫亲和法可纯化不同植物的同类几丁酶.与几丁质凝胶亲和柱相比,免疫亲和法纯化植物几丁酶具有快速、亲和柱可重复使用等的优点.利用免疫亲和层析获得的纯化样品,研究了苦瓜几丁酶对真菌的抑制试验,研究结果表明,苦瓜几丁酶能分解棉花枯萎病菌的菌丝体细胞壁制备物,并对其孢子芽管的伸长有一定抑制作用.
引用
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