人HIF1α基因重组逆转录病毒载体构建及鉴定

被引：6

作者：

段小军

杨柳

董世武

周跃

唐康来

胡鸢

机构：

[1] 第三军医大学西南医院骨科,第三军医大学西南医院骨科,第三军医大学基础医学部解剖学教研室,重庆市生物力学实验室,新桥医院骨科,第三军医大学西南医院骨科,第三军医大学西南医院骨科重庆,重庆,重庆,重庆,重庆,重庆

来源：

第三军医大学学报 | 2004年 / 18期

关键词：

逆转录病毒; 缺氧诱导因子-1; 基因克隆;

D O I：

暂无

中图分类号：

R346 [];

学科分类号：

摘要：

目的　构建人缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)基因重组逆转录病毒载体 ,并观察其对NIH3T3细胞感染效率。方法　采用基因工程技术 ,经过 2次亚克隆将HIF 1α基因片段克隆至含IRES EGFP逆转录病毒载体上 ,鉴定后用脂质体法转染PT67细胞进行包装、扩增 ,最后用重组逆转录病毒感染NIH3T3细胞。其中采用PCR方法对重组载体进行鉴定 ,利用绿色荧光蛋白作为报告基因 ,对病毒滴度和感染效率进行检测。结果　酶切鉴定及PCR结果与HIF 1α基因重组逆转录病毒载体的预期结果一致 ,病毒滴度达 ( 1 4× 10 6pfu/ml) ,并对NIH3T3细胞有强感染能力。结论　应用基因工程技术 ,成功构建了含人HIF 1α基因重组逆转录病毒载体 ,为应用于治疗性血管生成创造了条件

引用

页码：1639 / 1642

页数：4

共 3 条

[1]

小鼠Osf2/Cbfa1基因的重组腺病毒构建及鉴定 [J].