牛传染性鼻气管炎病毒gG蛋白的表达及gG-ELISA的建立

被引：12

作者：

颜邦芬 ^{[1
]}

陈锃 ^{[1
]}

张书环 ^{[1
]}

林祥梅 ^{[2
]}

陈颖钰 ^{[1
]}

晁彦杰 ^{[1
]}

李德学 ^{[3
]}

宋念华 ^{[3
]}

陈焕春 ^{[1
]}

郭爱珍 ^{[1
]}

机构：

[1] 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室

[2] 中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所

[3] 湖北省动物疫病诊断中心

来源：

生物工程学报 | 2007年 / 05期

关键词：

牛传染性鼻气管炎病毒; gG基因; ELISA; 原核表达;

D O I：

10.13345/j.cjb.2007.05.030

中图分类号：

S852.65 [家畜病毒学];

学科分类号：

090601 ;

摘要：

以牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）基因组DNA为模板,PCR扩增gG基因,克隆到T载体pMD18-T,经限制性酶切分析及序列测定鉴定正确后,进一步亚克隆至原核表达载体pGEX-KG。SDS-PAGE和Western blot分析表明,该基因在大肠杆菌BL21（DE3）中呈可溶性及包涵体两种形式表达,重组蛋白质具有免疫学活性。包涵体蛋白经提纯、变性、复性后,作为包被抗原建立了gG-ELISA诊断方法。应用该方法与进口试剂盒（IDEXX）平行检测380份血清样品,两种方法的符合率为92%（351/380）。对6份病毒分离阳性血清的检测均为阳性,对非相关病原的阳性血清及中监所的阴性血清检测均为阴性,表明所建立的IBRVgG抗体的ELISA检测具有良好的灵敏度与特异性。对1248份奶牛血清样本进行了检测,进口牛群的IBRV抗体阳性率平均为21.7%,湖北本地中国黑白花奶牛的抗体阳性率在不同牧场之间变化很大,范围为0.0%41.5%。

引用

页码：806 / 811

页数：6

共 15 条

[1] 牛传染性鼻气管炎病的研究进展 [J].