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分子病毒学.[M].黄文林主编;.人民卫生出版社.2002,
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Wilson病ATP7B基因重组腺病毒载体Ad-ATP7B的构建
被引：7
作者：
汤其强
梁秀龄
黄文林
黄必军
刘然义
机构：
[1] 中山大学第一附属医院神经内科,中山大学第一附属医院神经内科,中山大学肿瘤医院实验研究部,中山大学肿瘤医院实验研究部,中山大学肿瘤医院实验研究部广州,广州,广州,广州,广州
来源：
关键词：
肝豆状核变性;
腺病毒载体;
基因疗法;
D O I：
暂无
中图分类号：
R742.4 [肝豆状核变性];
学科分类号：
100204 [神经病学];
摘要：
目的构建Wilson病基因ATP7B的重组腺病毒载体。方法分别以BamHⅠ+SalⅠ双酶切pcDNA3.0/ATP7B和pDC315,将ATP7BcDNA目的基因片段和线性化的pDC315连接,定向克隆构建pDC315/ATP7B,以PCR和酶切的方法鉴定。pDC315/ATP7B与腺病毒骨架共转染293细胞构建Ad-ATP7B,PCR进行鉴定。结果经PCR和酶切鉴定证实pDC315/ATP7B构建成功。pDC315/ATP7B与腺病毒骨架共转染293细胞后见明显的毒斑,说明二者在293细胞中同源重组并包装成功。经PCR证实重组腺病毒Ad-ATP7B构建已完成。结论本实验成功构建了ATP7B外源目的基因序列完全正确的重组腺病毒载体Ad-ATP7B,为下一步采用ATP7B基因重组腺病毒载体对Wilson病进行基因治疗打下了基础。
引用
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