黄芩苷完全抗原的合成鉴定及其多克隆抗体的制备

目的:研究黄芩苷作为一种半抗原分子,通过与载体蛋白偶联形成完全抗原后,使免疫动物血清中产生特异性抗体的可能性,为进一步建立黄芩苷的免疫分析测定方法提供实验依据。方法:采用活性酯法将黄芩苷(BAL)与牛血清白蛋白(BSA)偶联,制备黄芩苷完全抗原(BAL-BSA),并采用红外吸收光谱法、SDS-PAGE法、MALDI-TOF-MS法对其进行鉴定。用此完全抗原免疫动物制备抗血清,通过间接ELISA法检测其抗体效价。结果:完全抗原BAL-BSA中BAL与BSA的偶联比为3∶1;用此完全抗原免疫的家兔产生针对BAL的多克隆抗体,抗体效价最高可达1∶8000。结论:成功合成了BAL的完全抗原BAL-BSA,且该抗原具有良好的反应原性与免疫原性。