乙型肝炎病毒表面抗原主蛋白基因转基因细胞系的建立与细胞性质的研究

被引:13
作者
任贵方
阮薇琴
田淑芳
梅雅芳
阮力
杨安道
杨芙蓉
王申
王秀平
朱既明
机构
[1] 中国预防医学科学院病毒学研究所,中国预防医学科学院病毒学研究所,中国预防医学科学院病毒学研究所,中国预防医学科学院病毒学研究所,中国预防医学科学院病毒学研究所,中国预防医学科学院病毒学研究所,中国预防医学科学院病毒学研究所,中国预防医学科学院病毒学研究所,中国预防医学科学院病毒学研究所,中国预防医学科学院病毒学研究所北京,北京,北京,北京,北京,北京,北京,北京,北京,北京
关键词
乙型肝炎病毒; 主蛋白基因; 转基因细胞系; 细胞性状;
D O I
10.13242/j.cnki.bingduxuebao.000661
中图分类号
学科分类号
摘要
使用本研究室以前构造的双拷贝乙肝病毒重组DNA质粒pSV2DHBR2-32经改造构成pSV2DHBR1-32。用此质粒转化CHO-dhfr-细胞,经克隆、选择、加压增殖建立7个高产HBs-Ag的细胞系,其中首选B43对其生物学性状研究的结果说明,未发现微生物污染,无致瘤性,遗传稳定,纯度满意,核酸杂交试验说明该细胞是整合型,每个细胞约有200个左右的S基因拷贝,转瓶培养研究B43细胞分泌HBsAg的最佳条件为转瓶容积4升,表面积1300cm2,细胞长成单层后换维持液150ml,其后每48小时收、换液1次,在36℃每小时8转,连续收液60天左右, 每升收液最高产HBsAg为7.5mg。此细胞可用作乙肝基因工程疫苗生产的候选细胞系。
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