环孢素A对百草枯中毒大鼠线粒体自噬导致的肺纤维化作用研究

目的建立百草枯(PQ)中毒大鼠模型,探讨环孢素A(CsA)对PQ中毒大鼠肺线粒体自噬的作用及机制。方法成年雄性SD大鼠54只,随机分为正常对照组(n=12)、PQ组(n=24),CsA大、中、小剂量组(n=18)。PQ组下设1天、3天、7天和14天4个时间点,每个时间点每个剂量组各6只大鼠。使用20%PQ溶液50mg/kg一次性灌胃建立大鼠PQ中毒模型,并以自噬发生明显的时间点作为CsA干预时间点。各CsA干预组在给予20%PQ溶液灌胃的前3天开始分别予环孢素5mg/(kg·d)、10mg/(kg·d)、15mg/(kg·d)灌胃。通过Masson染色观察PQ中毒后肺组织病理损害,JC-1染色检测肺组织线粒体膜电位变化,Western blot检测调控线粒体自噬关键性蛋白PINK1、Parkin的水平变化。结果与正常对照组相比,随着PQ中毒时间的延长,PQ中毒大鼠肺纤维化病理评分升高,肺组织JC-1红绿荧光比降低,PINK1及Parkin蛋白表达均升高,差异有统计学意义(P<0.01)。与PQ组比较,环孢素A组大鼠肺组织肺纤维化病理评分、PINK1及Parkin蛋白均下降,差异有统计学意义(P<0.05),JC-1红绿荧光比升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论环孢素A可通过影响PINK1/Parkin蛋白,减轻百草枯中毒引起的线粒体自噬,改善肺纤维化。