代表活性污泥中苯酚降解菌群的ERIC-PCR产物片段的多态性

被引:9
作者
高平平
王健
席玉英
赵立平
机构
[1] 山西大学生物技术研究所,山西大学生物技术研究所,山西大学环境与资源学院,上海交通大学生命科学技术学院太原,太原,太原,上海
关键词
群落结构ERIC-PCR指纹图; 特征性条带; 基因组片段测序;
D O I
暂无
中图分类号
X172 [环境微生物学];
学科分类号
071012 ; 0713 ;
摘要
对可能代表活性污泥中两个时期的主要苯酚降解菌群的 ERIC- PCR指纹图谱中的两条 2 .1 kb的条带 ( P1和 P8)中的 DNA片段进行克隆、转化 ,得到 1 93个转化子。 H inf I物理图谱分析得到 35种酶切类型 ,将两端各进行 1次测序后 ,同源性大于 90 %的克隆归为一类 ,共得到 1 0种序列类型。对各类型的代表克隆进行了全长测序 ,5种类型为 P1条带所有 ,3种类型为 P8所有 ,二者共享的类型为 2种 ,丰度最高的片段为 S3,P1条带中 76.3%的转化子和 P8条带中 66.7%转化子属该类型。对所得序列进行检索分析 ,它们与 Gen Bank中已知基因序列均无显著同源性。用 S3特异性引物对活性污泥样品及其它在 LB、d CGY、MP和 FWM培养基上的回收菌进行扩增 ,除 LB上的回收菌没有显示目的条带外 ,活性污泥和其回收菌中均检测到带有该基因组片段的菌种的存在。研究为专一性分离降酚活性污泥中的优势菌提供了分子探针
引用
收藏
页码:1095 / 1100
页数:6
相关论文
共 9 条
[1]   可用于微生物群落分子生态学研究的活性污泥总DNA提取方法研究 [J].
高平平 ;
赵立平 .
生态学报, 2002, (11) :2015-2019
[2]   ERIC-PCR:一种快速鉴别环境细菌菌株的方法 [J].
赵立平 ;
肖虹 ;
李艳琴 ;
张峰 ;
不详 .
应用与环境生物学报 , 1999, (S1) :30-33
[3]   Design and evaluation of PCR primers to amplify bacterial 16S ribosomal DNA fragments used for community fingerprinting [J].
Watanabe, K ;
Kodama, Y ;
Harayama, S .
JOURNAL OF MICROBIOLOGICAL METHODS, 2001, 44 (03) :253-262
[4]   Species-identification dots: a potent tool for developing genome microbiology [J].
Naimuddin, M ;
Kurazono, T ;
Zhang, YH ;
Watanabe, T ;
Yamaguchi, M ;
Nishigaki, K .
GENE, 2000, 261 (02) :243-250
[5]   Searching for predominant soil bacteria: 16S rDNA cloning versus strain cultivation [J].
Felske, A ;
Wolterink, A ;
van Lis, R ;
de Vos, WM ;
Akkermans, ADL .
FEMS MICROBIOLOGY ECOLOGY, 1999, 30 (02) :137-145
[6]   Fingerprinting of mixed bacterial strains and BIOLOG gram-negative (GN) substrate communities by enterobacterial repetitive intergenic consensus sequence-PCR (ERIC-PCR) [J].
Di Giovanni, GD ;
Watrud, LS ;
Seidler, RJ ;
Widmer, F .
CURRENT MICROBIOLOGY, 1999, 38 (04) :217-223
[7]   Microbiological and molecular biological methods for monitoring microbial inoculants and their effects in the soil environment [J].
van Elsas, JD ;
Duarte, GF ;
Rosado, AS ;
Smalla, K .
JOURNAL OF MICROBIOLOGICAL METHODS, 1998, 32 (02) :133-154
[8]   Evaluation of denaturing gradient gel electrophoresis in the detection of 16S rDNA sequence variation in rhizobia and methanotrophs [J].
Vallaeys, T ;
Topp, E ;
Muyzer, G ;
Macheret, V ;
Laguerre, G ;
Rigaud, A ;
Soulas, G .
FEMS MICROBIOLOGY ECOLOGY, 1997, 24 (03) :279-285
[9]  
分子克隆实验指南.[M].(美)J.萨姆布鲁克(J.Sambrook)等著;金冬雁等译;.科学出版社.1992,