Fas、NF-κB及Caspases在TNFα介导的微血管内皮细胞凋亡中的作用

被引:13
作者
曹翔
金惠铭
机构
[1] 复旦大学医学院病理生理学教研室,复旦大学医学院病理生理学教研室上海,上海
关键词
凋亡; 内皮,血管; 肿瘤坏死因子; 凋亡蛋白酶类; 抗原,CD95; NF-κB;
D O I
暂无
中图分类号
R363 [病理生理学];
学科分类号
100104 ;
摘要
目的 :研究肿瘤坏死因子α(TNFα)引起微血管内皮细胞凋亡的特点及Fas(即CD95抗原 )、NF -κB和caspases在此种凋亡中的作用。方法 :用TUNEL、流式细胞仪等方法测定TNFα引起体外培养的大鼠肺微血管内皮细胞 (下称内皮细胞 )凋亡。用Northernblot、Fas抗体测定TNFα对内皮细胞Fas表达的影响及Fas在内皮细胞凋亡中的作用。用Westernblot、免疫组化测定TNFα作用后凋亡蛋白酶caspase - 8、caspase- 3的活化与表达。结果 :细胞生长曲线显示TNFα抑制内皮细胞增殖 ,并呈剂量依赖关系。TUNEL法测凋亡百分率为 14.0 %± 3.1% ,流式细胞仪测凋亡百分率为 13.1%。NF -κB抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸盐 (APDC)与TNFα共同作用后 ,细胞凋亡增加。TNFα作用后内皮细胞的Fas表达增高 ,用Fas抗体与TNFα共同作用 ,细胞凋亡增加。TNFα作用下caspase- 8活化显著增加 ,caspase - 3表达增多。caspase - 3抑制剂与TNFα共同作用 ,细胞凋亡减少。结论 :大剂量TNFα (5× 10 6U/L)能够引起一定量的体外培养的内皮细胞发生凋亡。NF -κB有抗内皮细胞凋亡的作用。TNFα上调内皮细胞Fas表达 ,后者参与内皮细胞凋亡。TNFα所引起的内皮细胞凋亡与caspase- 8及caspase - 3的作用有关
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