四逆散加味抗肝纤维化的作用及机制研究

目的:研究四逆散加味对肝纤维化转化生长因子-β1(TGF-β1)、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和基质金属蛋白酶(MMP-13)、金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-1)的作用及其相关性,探讨其抗肝纤维化的作用机制。方法:70只Wister大鼠随机分为7组:正常对照组、病理模型组、四逆散组、四逆散加味高、中、低剂量组、四逆散预防组。除正常对照组外,其余各组均采用猪血清ip诱发肝纤维化,0.5 mL/只,2次/周,连续10周,5周后即可形成肝纤维化。预防组于造模同时给药(以四逆散加味7 g.kg-1),各治疗组于造模第6周给药,连续10周。四逆散组4 g.kg-1,四逆散加味高、中、低剂量组(14,7,3.5 g.kg-1)。采用免疫组化S-P法检测肝组织TGF-β1,p-p38MAPK,α-SMA,MMP-13和TIMP-1蛋白阳性染色吸光度(A)。结果:正常组与模型组的TGF-β1依次为[(0.75±0.25)vs(8.67±0.64),P<0.01],p-p38MAPK[(21.71±0.37)vs(80.25±0.53),P<0.01],α-SMA[(3.32±0.64)vs(10.55±0.34),P<0.05]和TIMP-1[(25.57±6.46)vs(200.25±20.36),P<0.01]蛋白表达均显著减弱。四逆散加味中剂量与模型组比较TGF-β1[(5.19±2.33)vs(8.67±0.64),P<0.05],p-p38MAPK[(47.55±0.58)vs(80.25±0.53),P<0.05],α-SMA(6.21±0.78)vs(10.55±0.34),P<0.01)和TIMP-1[(86.02±51.37)vs(200.25±20.36),P<0.01]蛋白表达显著减弱;MMP-13[(109.59±33.21)vs(35.87±6.35),P<0.01]蛋白表达显著增强。结论:四逆散加味有明显的抗肝纤维化作用。其机制可能经TGF-β/p38MAPK信号转导通路抑制肝星状细胞(HSC)活化,使HSC低表达TIMP-1,高表达的MMP-13促进基质降解有关。