非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝细胞和库普弗细胞同时分离及鉴定

被引：15

作者：

冯高飞 ^{[1
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杨钦河 ^{[1
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王文晶 ^{[1
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何秀敏 ^{[1
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张玉佩 ^{[1
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纪桂元 ^{[2
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李光秋 ^{[1
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赵亚凤 ^{[1
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沈灿宏 ^{[1
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杨晓蕾 ^{[1
]}

机构：

[1] 暨南大学医学院中医系

[2] 中山大学公共卫生学院营养系

来源：

广东医学 | 2012年 / 33卷 / 01期

关键词：

非酒精性脂肪性肝炎大鼠; 肝细胞; 库普弗细胞; 同时分离; 鉴定;

D O I：

10.13820/j.cnki.gdyx.2012.01.036

中图分类号：

R575.1 [肝炎];

学科分类号：

100201 [内科学];

摘要：

目的建立一种稳定、高效、同时分离非酒精性脂肪性肝炎(nonalcohlic steatohepatitis,NASH)大鼠肝细胞(hepatocytes,HCs)和库普弗细胞(Kupffer cells,KCs)的新方法。方法采用离体循环灌注Ⅳ型胶原酶,低速离心获取HCs;差速离心、密度梯度离心和选择性贴壁获得KCs。用Typan blue染色和流式细胞术(FCM)分别进行活性和纯度鉴定。结果每只大鼠获得纯化的HCs[(4.0～4.5)×108]、KCs[(1.5～2.0)×107],经Typanblue染色活力均在95%以上,FCM检测纯度均在90%以上。结论此实验建立同时分离NASH大鼠HCs和KCs的方法高效、稳定,细胞数量和纯度都符合进一步实验的要求。

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