应用平阳霉素与单克隆抗体Fab′片段偶联物抑制肝癌生长与肿瘤肝转移

目的　研制一种具有抑制肝癌生长和肿瘤肝转移作用的单克隆抗体Fab′片段与平阳霉素 (PYM)偶联物。方法　以胃蛋白酶酶解结合二巯基苏糖醇 (DTT)还原法制备单抗Fab′片段 ;以葡聚糖T 40 (dextranT 40 )为中介体制备Fab′片段和PYM偶联物Fab′ PYM ;用间接ELISA法、2 ,3 ,5 氯化三苯基四氮唑 (TTC)抑菌效价检测法 ,克隆形成法及动物移植性肿瘤模型测定Fab′ PYM偶联物在体外的生物学活性与在小鼠体内的抗肿瘤作用。结果　Fab′ PYM与BEL 740 2、肝癌 2 2 (H2 2 )及HT 2 9细胞呈免疫学阳性反应 ,但与KB细胞无反应 ;偶联物中PYM的抑菌活性为游离PYM的 15 % ;Fab′ PYM对体外培养的BEL 740 2细胞、HT 2 9细胞和KB细胞的 5 0 %抑制浓度 (IC50 )分别为 0 0 2、0 0 8及 0 5 0μmol/L ;静脉注射 10mg/kgFab′ PYM偶联物和PYM皮下接种对小鼠肝癌 2 2的抑瘤率分别为 86 %和6 2 % ;腹腔注射 ,10mg/kgFab′ PYM偶联物和PYM对小鼠脾内接种的结肠癌 2 6肝转移的抑制率分别为 91%和 6 2 %。结论　Fab′ PYM偶联物具有比游离平阳霉素更强的抑制肝癌生长与肿瘤肝转移作用。