宁夏枸杞发根农杆菌转化系的建立及影响转化因素的研究

以发根农杆菌 A4 菌株介导 ,对宁夏枸杞叶片和茎切段的遗传转化进行了初步研究 ,建立了发状根体系 ,并优化了转化条件。乙酰丁香酮的添加、农杆菌液的浓度、共培养时间、外植体取材部位及时间 ,均可以影响发状根的诱导频率。采用添加 1 0 0 μmol/L的乙酰丁香酮、振荡培养 2 4 h的 A4 菌液感染 3周龄的叶片切段 ,并共培养 3d,可以得到最佳的转化效果 ,发状根的诱导率为 48.9%。在同样的转化条件下 ,只有 1 3.6%的茎切段上能诱导出发状根。在感染菌液之前 ,外植体预培养 3d对发状根的诱导也有一定的促进作用。