Red重组系统及在微生物基因敲除中的应用

被引:18
作者
胡堃
史兆兴
赛道建
黄留玉
机构
[1] 军事医学科学院生物工程研究所,军事医学科学院生物工程研究所,山东师范大学生命科学学院,军事医学科学院生物工程研究所北京,山东师范大学生命科学学院,济南,北京,济南,北京
关键词
Red重组系统; 基因敲除; 抗药性基因;
D O I
10.16288/j.yczz.2003.05.030
中图分类号
Q933 [微生物遗传学];
学科分类号
071007 ;
摘要
在完成了对各种微生物基因组的测序以后,功能基因学的研究变得尤为重要。研究基因功能最直接的方法便是将待研究的基因失活。最初构建基因突变体是采用大肠杆菌的RecA系统,但是RecA重组系统操作复杂,重组效率低。最近建立了Red重组系统,该系统由3个蛋白组成:α蛋白(即λ核酸外切酶),β蛋白,Gam蛋白。应用Red系统进行基因敲除,可以直接利用线性打靶DNA,两侧同源臂长度在35~60bp即可发生同源重组,且重组效率高。
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