产甲壳素酶菌株的发酵条件、酶的分离纯化及酶学性质研究

被引：5

作者：

韩宝芹 ^{[1
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伊金玲 ^{[1
]}

蔡文娣 ^{[2
]}

杨艳 ^{[1
]}

董文 ^{[1
]}

刘万顺 ^{[1
]}

机构：

[1] 中国海洋大学海洋生命学院

[2] 潍坊医学院

来源：

中国海洋大学学报(自然科学版) | 2010年 / 40卷 / 10期

关键词：

甲壳素酶; 发酵条件; 分离纯化; 酶学性质;

D O I：

10.16441/j.cnki.hdxb.2010.10.010

中图分类号：

Q814 [酶工程];

学科分类号：

082203 ;

摘要：

利用甲壳素为唯一碳源从土壤中筛选得到1株产甲壳素酶活力较高的菌株HD002,初步鉴定其为Massilia属。确定菌株产甲壳素酶的最适培养基组成为(g/L):(NH4)2SO45,K2HPO40.7,KH2PO40.3,MgSO4.7H2O 1,胶体甲壳素10;最适产酶培养条件为:培养基起始pH值6.0,培养时间192 h,发酵液酶活力达1.314 U/mL。采用70%饱和度硫酸铵盐析、DEAE-Sepharose F.F阴离子交换层析、Sephadex G-75凝胶过滤层析对该甲壳素酶进行纯化,SDS-PAGE证明达到电泳纯。该甲壳素酶的分子量为60.2 kDa,最适反应温度为55℃,最适反应pH值为5.0,Cu2+和Fe3+对酶活力有明显的抑制作用,Ca2+和Na+对酶活力有明显的促进作用。

引用

页码：57 / 62+74 +74

页数：7

共 4 条

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