牛口蹄疫病毒VP2结构蛋白抗体间接ELISA方法的建立

被引:5
作者
张润祥 [1 ]
高明春 [1 ]
曲哲会 [2 ]
李爽 [1 ]
曹永生 [1 ]
宋军 [1 ]
宋鸽 [1 ]
刘丹丹 [1 ]
王君伟 [1 ]
机构
[1] 东北农业大学动物医学学院
[2] 信阳农业高等专科学校动物科学系
关键词
口蹄疫病毒; VP2蛋白; 间接ELISA;
D O I
暂无
中图分类号
S852.65 [家畜病毒学];
学科分类号
090507 [智慧养殖与动物生产学];
摘要
为建立牛口蹄疫(FMD)抗体的检测方法,本研究将口蹄疫病毒(FMDV)的VP2基因,通过pPROEXTM HTb表达载体在大肠杆菌DH5α中表达,获得大小为35ku的重组VP2蛋白(rVP2),western blot证实rVP2可与FMDV5种血清型的牛阳性血清发生特异性反应。以纯化复性的rVP2为抗原建立了FMDVrVP2间接ELISA方法。重复性试验证实批内、批间变异系数均小于10%。特异性交叉试验表明,该抗原不与常见的其他7种牛病阳性血清发生交叉反应。检测非免疫无口蹄疫国家牛阴性血清的特异性为100%;检测感染血清敏感性为97.3%;检测O-AsiaⅠ的二价苗免疫牛血清,与4种商品化试剂盒比较,其符合率分别为69.0%、95.0%、90.4%和86.8%。实验结果表明建立的ELISA方法可以用于口蹄疫感染和免疫抗体检测。
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