菌落PCR快速扩增工业酿酒酵母基因组DNA片段

被引:6
作者
阳辛凤 [1 ,2 ,3 ]
高秋芳 [1 ]
李锡敏 [1 ]
郭安平 [1 ]
孔华 [1 ]
贺立卡 [1 ]
机构
[1] 中国热带农业科学院热带生物技术研究所
[2] 海南大学农学院
[3] 中国热带农业科学院分析测试中心
关键词
酿酒酵母; 菌落PCR; 破壁;
D O I
10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2010.09.021
中图分类号
Q78 [基因工程(遗传工程)];
学科分类号
071007 ; 0836 ; 090102 ;
摘要
针对工业酿酒酵母细胞破壁难和提取基因酵母组DNA费时长(2-3 h/样品)的问题,研究了SDS-微珠涡旋破壁的方法。以破壁液上清为模板进行菌落PCR扩增酿酒酵母南阳K基因组中铜抗性蛋白基因(cup1)片段和rDNA片段。结果表明,在不需要提取酵母基因组前提下,利用该方法能有效地扩增酵母基因组DNA片段,同时该方法也适用于对转基因酿酒酵母进行菌落PCR从而实现对转化子的准确和快速地鉴定筛选,是一种成本低和易于操作的适于处理大量样品的方法。
引用
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页码:215 / 219
页数:5
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