杜氏盐藻2种碳酸酐酶基因5’上游的克隆与序列分析

被引：8

作者：

吕玉民

姜国忠

牛向丽

谢华

张贵星

薛乐勋

机构：

[1] 郑州大学细胞生物学研究室

[2] 郑州大学细胞生物学研究室郑州

[3] 郑州

来源：

郑州大学学报(医学版) | 2004年 / 01期

关键词：

杜氏盐藻; 碳酸酐酶; 5’-上游区;

D O I：

10.13705/j.issn.1671-6825.2004.01.001

中图分类号：

Q786 [基因的表达];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

目的 :克隆盐藻 2种碳酸酐酶基因 (DCA1、CA1 ) 5’上游区序列 ,并对其进行测序和序列分析。方法 :利用DraⅠ、EcoRV、PvuⅡ和StuⅠ 4种平端限制内切酶分别酶切盐藻基因组DNA ,并与衔接头连接 ,构建成盐藻步行基因组文库GWL1、GWL2、GWL3和GWL4 ;巢式PCR方法从盐藻步行基因组文库中扩增DCA1和CA1基因 5’上游区序列 ,双脱氧末端终止法测序。结果 :DCA1基因 ,在GWL1、GWL3中分别扩增出约 1 .3kb和 4 .5kb的特异带 ,而CA1基因 ,则在GWL2、GWL4中分别扩增出 1 .7kb和 2 .5kb的特异带 ;序列分析结果表明 ,所得序列的 3’端与已知DCA1、CA1基因cDNA 5’端序列完全一致。该 2序列均有多个与转录调控有关的保守序列 (如TATA -box、CAAT -box)和富含GT的重复序列等许多相似之处。结论 :采用基因组步行方法从已知cDNA周围未知启动子或其他调控区域中克隆得到的DCA1、CA1基因的 5’上游区序列 ,可能是 2种新的杜氏盐藻碳酸酐酶基因的启动子区序列

引用

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[1] 盐藻启动子活性片段的克隆及序列分析 [J].