单核细胞增生李斯特氏菌依赖解旋酶DNA恒温扩增检测方法的建立

被引:8
作者
王建广 [1 ,2 ]
雷质文 [2 ]
石琰璟 [1 ]
付静芸 [3 ]
祝素珍 [2 ]
房保海 [2 ]
姜英辉 [2 ]
刘云国 [2 ]
张健 [2 ]
杨大伟 [2 ]
机构
[1] 青岛科技大学
[2] 山东出入境检验检疫局
[3] 中国海洋大学
关键词
单核细胞增生李斯特氏菌; 检测; 依赖解旋酶DNA恒温基因扩增;
D O I
暂无
中图分类号
S854.43 [];
学科分类号
摘要
为建立单核细胞增生李斯特氏菌(Lm)的依赖解旋酶DNA恒温扩增(HDA)检测方法,本研究以Lm的iap基因为目的片段设计特异性引物,建立了可在65℃恒温扩增快速(90 min)检测Lm的HDA检测方法,分别对反应体系中的MgAc2、Bst聚合酶、UvrD解旋酶、dNTPs以及引物等的浓度进行优化,进行了特异性和灵敏度试验,并与普通PCR方法进行了比较。结果表明,所建立起的检测法最低检测限为7.8×103 cfu/mL,灵敏度与普通PCR方法相当。Lm的HDA检测方法具有普通PCR的特异、灵敏等特点,并且对仪器要求更低,具有良好的应用前景。
引用
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页码:130 / 132
页数:3
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