补肾健脾方对尾部悬吊大鼠骨髓间充质干细胞GSK-3β及β-catenin表达的影响

目的:探讨补肾健脾方药对尾部悬吊大鼠骨髓间充质干细胞成骨诱导分化后GSK-3β、β-catenin表达的影响。方法:随机将30只大鼠分为正常组、悬吊组、补肾健脾组,悬吊组、补肾健脾组采用头低位-30°尾部悬吊法模拟失重,补肾健脾组给予补肾健脾方灌服,其他两组给予等量0.9%氯化钠溶液。灌胃第22天取各组大鼠双侧胫骨行HE染色进行骨组织形态学观察,取双侧股骨和胫骨分离培养骨髓间充质干细胞(BMSCs)进行培养,于诱导第15天,取出96孔板,采用p-NPP法检测BMSCs ALP活性,免疫组织化学染色及Western blot法检测BMSCs GSK-3β、β-catenin的表达情况。结果:与正常组比较,悬吊组BMSCs ALP活性明显降低(P<0.01);与悬吊组比较,补肾健脾组BMSCs ALP活性升高(P<0.05)。与正常组比较,悬吊组BMSCs核中GSK-3β表达较强、蛋白表达水平显著升高(P<0.01),β-catenin表达水平显著降低(P<0.01);与悬吊组比较,补肾健脾组BMSCs核中GSK-3β表达降低、蛋白表达水平降低(P<0.05),β-catenin表达显著升高(P<0.05)。结论:补肾健脾方对尾部悬吊大鼠的骨丢失具有防治作用,其作用机制可能与促进BMSCs成骨诱导分化后β-catenin的表达、抑制GSK-3β的表达,激活Wnt通路有关,通过Wnt信号通路的激活,以促进骨形成。