小干扰RNA抑制CD97的表达及其对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响

被引:7
作者
施小宇 [1 ]
陶思丰 [2 ]
陈力 [1 ]
彭淑牖 [1 ]
HOANGVU Cuong [3 ]
机构
[1] 浙江大学医学院附属第二医院普外科
[2] 浙江大学医学院附属第二医院肿瘤外科
[3] 德国哈勒-维腾贝格马丁·路德大学外科系
关键词
CD97; 小干扰RNA; 细胞迁移; 肿瘤侵袭; AGS细胞; MGC803细胞;
D O I
暂无
中图分类号
R735.2 [胃肿瘤];
学科分类号
100112 [医学生物化学与分子生物学];
摘要
目的:设计合成有效的siRNA-CD97,体外转染胃癌细胞株,观察CD97表达改变及其与胃癌细胞株迁移、侵袭能力改变的关系。方法:采用AGS和MGC803胃癌细胞株。针对CD97基因设计siRNA,采用化学法合成,筛选出最有效的siRNA-CD97。siRNA-CD97转染胃癌细胞后分别用real-time RT-PCR、免疫荧光流式细胞术检测CD97 mRNA和蛋白表达的改变,MTT法检测细胞活性的改变,并用Transwell细胞迁移和侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力的变化。结果:在siRNA-CD97转染后48 h,real-time RT-PCR结果显示AGS和MGC803细胞CD97 mRNA的表达量相对于未转染的细胞分别下降了(89.34±9.95)%和(95.42±1.93)%。转染后72 h,流式细胞术结果显示AGS细胞CD97EGF和CD97stalk抗原的表达强度相对于未转染的细胞分别下降了(19.29±3.45)%和(30.11±5.93)%,MGC803细胞CD97EGF和CD97stalk抗原的表达强度相对于未转染的细胞分别下降了(26.25±5.73)%和(16.22±3.23)%。MTT法检测结果显示,siRNA-CD97转染前后细胞的吸光度值没有显著差异。迁移和侵袭实验结果显示,AGS细胞siRNA-CD97转染组迁移和侵袭细胞相对于未转染组分别下降了(67.63±12.03)%和(68.02±15.63)%,MGC803细胞转染组迁移和侵袭细胞相对于未转染组分别下降了(14.92±2.03)%和(22.09±5.43)%。结论:胃癌细胞转染siRNA-CD97能够抑制CD97 mRNA和蛋白表达,随着CD97表达的降低,细胞迁移和转移的能力也明显减弱。
引用
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页码:1285 / 1289
页数:5
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