PCR检测金黄色葡萄球菌肠毒素A、E基因

目的建立一种用PCR快速敏感地检测金黄色葡萄球菌肠毒素A、E的方法。方法根据genebank报道的编码金黄色葡萄球菌肠毒素A、E的基因序列,设计一对特异性引物来扩增靶基因片段,长度为327 bp,通过对金黄色葡萄球菌产肠毒素A、E菌株和14株非金黄色葡萄球菌产肠毒素A、E菌株进行检测,评价该方法的特异性;对金黄色葡萄球菌产肠毒素E菌株做系列10倍稀释,进行PCR检测,对其敏感性进行分析;PCR扩增产物进行电泳和测序鉴定。结果金黄色葡萄球菌肠毒素A、E菌株出现PCR扩增反应,14株非金黄色葡萄球菌产肠毒素A、E菌株没有出现PCR扩增反应,通过测序分析证实了PCR产物的特异性;PCR检测金黄色葡萄球菌肠毒素E基因的检测下限为120 cfu/ml。结论建立了一个快速、特异、敏感的金黄色葡萄球菌肠毒素A、E基因的PCR检测方法,可用于金黄色葡萄球菌肠毒素的临床诊断和食品安全监测。