土壤细菌群落密度实时荧光定量PCR检测体系的建立

被引:21
作者
顾卿 [1 ,2 ]
许艳丽 [1 ]
魏巍 [1 ,3 ]
刘爽 [4 ]
机构
[1] 中国科学院 东北地理与农业生态研究所 黑土区农业生态院重点实验室,海伦农田生态系统国家野外观测研究站
[2] 东北林业大学
[3] 中国科学院研究生院
[4] 中国科学院生态环境研究中心
关键词
土壤微生物; 实时荧光定量PCR; 绝对定量;
D O I
暂无
中图分类号
S154.3 [土壤微生物学];
学科分类号
090301 [土壤学];
摘要
为了建立土壤环境样品中细菌群落的定量分析体系,选用了多环芳烃污染土壤处理P1和P2,以及无多环芳烃污染的裸地生态系统土壤C等3种处理,利用构建克隆子的方法制作标准样品,并对实时荧光定量PCR标准曲线的线性(R2)、扩增效率(E)以及斜率(S)等相关参数进行了优化。结果表明,标准曲线的线性R2=0.985、扩增效率E=101.7%以及斜率S=-3.282,均符合参数符合要求。土壤样品P1、P2和C的细菌16SrDNA片段拷贝数为1.4×109个·g-1、4.0×109个·g-1和5.0×109个·g-1。说明建立的实时荧光定量PCR检测体系可以灵敏地定量未知模板的土壤细菌数量。图3,参11。
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